分析測試百科網(wǎng)訊 8月16日第二屆全國樣品制備學(xué)術(shù)報告會的下午報告內(nèi)容精萃：
北京大學(xué)白玉：基于新型納米材料的磷酸化肽富集新方法研究
北京大學(xué)的白玉教授做題為《基于新型納米材料的磷酸化肽富集新方法研究》的報告。蛋白質(zhì)組研究中的磷酸化翻譯后修飾是非常重要的，而方法策略中必須進行 有效富集。2012年Cell綜述介紹：在富集策略方面，近年來發(fā)展了免疫沉淀、IMAC、SCX、MOAC（金屬氧化物親和色譜）和其它種方法。白教授 主要介紹MOAC方法。磷酸化肽的磷酸根和金屬氧化物形成配位作用，進行富集，加入相對偏堿性的如氨水即能解吸附。MOAC的特性為：形貌不同的金屬材料 富集行為差異；組成不同的金屬材料富集行為差異；稀土金屬化合物誘導(dǎo)去磷酸化現(xiàn)象；不同功能化納米材料的富集行為差異。白玉教授主要介紹了課題組發(fā)展的幾 種MOAC材料和研究的結(jié)果，其中，二元材料ZnSn(OH)6-SnO2，適于單多磷酸化肽；多孔材料如Porous SnO2，方法簡單富集效果好；稀土材料GdF3 是新型稀土富集材料；功能納米材料Guanidyl-functionalized graphene，適用于雙功能/連續(xù)磷酸化肽。
車金水：賽默飛Online GPC-GC/MS技術(shù)及在食品分析中的應(yīng)用
賽默飛的應(yīng)用工程師車金水做了題為《賽默飛Online GPC-GC/MS技術(shù)及在食品分析中的應(yīng)用》的報告。賽默飛提供ASE加速溶劑萃取儀（ASE150和ASE350型）和大體積固相萃取儀 （AutoTrace 280）。車金水接下來介紹賽默飛GPC-GC/MS技術(shù)，并介紹了其在分析蔬菜中181種農(nóng)藥多殘留和食品中污染物的應(yīng)用。該系統(tǒng)由Ultimate 3000和Trace GC 1310-ISQ氣質(zhì)聯(lián)用儀組成，柱子采用Shodex EV-200商品化柱。廣州CIQ等單位已購買該設(shè)備。技術(shù)亮點為：（1）在LC-GC接口方面使用單六通閥，連接簡單；（2）吹掃氣控制，背景低。 （3）GC-MS掃描的質(zhì)量可以從50開始，對低分子量的目標組分沒有歧視。（4）大體積進樣技術(shù)。
賽默飛在線GPC-GC/MS的優(yōu)點為：（1）優(yōu)良的凈化效果，更高的結(jié)果準確度。（2）前處理簡單，可結(jié)合QuEChERS方法快速分析農(nóng)藥多殘留。（3）溶劑消耗少，維護成本低，24小時溶劑消耗僅為144mL。（4）儀器重現(xiàn)性好，不受人為操作影響。
除在線GPC-GC/MS外，車金水還介紹了賽默飛Online SPE-HPLC法測定臘肉/香腸中苯并[alpha]芘的含量的應(yīng)用；該系統(tǒng)基于賽默飛特色的雙三元液相色譜（DGLC）的在線固相萃取/濃縮過程，可 對復(fù)雜樣品進行簡單方便、快速、完全自動化的前處理。特色為：第一維SPE小柱從基體中分離待測物；將待測物轉(zhuǎn)移至分析柱并在分析柱上分離、測定(洗脫液 無吹干、定容)；分析過程中，SPE 小柱同時進行清洗、再生。
中糧營養(yǎng)健康研究院楊永壇：食用油中危害成分分析的樣品制備技術(shù)
中糧營養(yǎng)健康研究院的楊永壇研究員做題為《食用油中危害成分分析的樣品制備技術(shù)》的報告。他首先介紹了食用油的食品安全研究背景。2013年我國食用油 的消費量達3167.4萬噸，人均23.25kg/人；包括大豆油、菜籽油、花生油、玉米油、山茶籽油等。在從農(nóng)田到餐桌的工藝中，危害物污染來源包括： 環(huán)境污染、加工過程污染、包裝污染；危害物污染種類包括：農(nóng)藥殘留、真菌毒素、苯并(a)芘、增塑劑、3-氯丙醇酯；食用油危害成分分析的關(guān)鍵難點：就是 食用油分析中的樣品前處理技術(shù)。
食用油危害成分分析中常用的樣品前處理技術(shù)有：液液分配，但液液分配凈化效果較差，雜質(zhì)干擾嚴重；分散固相萃取法；固相萃取法；凝膠滲透色譜法；多功能凈化柱法；免疫親和柱色譜法；化學(xué)處理法：如檢測部分農(nóng)藥殘留的磺化法和檢測3-氯丙醇酯的酸水解法。
楊研究員隨后介紹了幾種方式包括：可實現(xiàn)“一步式”樣品前處理方式分散固相萃?。╠SPE）；凝膠滲透色譜法；柱后衍生法；多功能凈化柱；免疫親和柱 法；并比較了多功能凈化柱和免疫親和柱法的特點。楊研究員還舉例介紹了食用油危害成分分析的樣品技術(shù)。如食用油中真菌毒素（如黃曲霉毒素）、增塑劑、苯并 (alpha)芘、氯丙醇酯等危害成分分析。最后介紹了GC-MS/MS測定食用油中四類危害成分的方法，研究對象為：《GB 2763-2014 食品中農(nóng)藥最大殘留限量》對食用油有限量規(guī)定的農(nóng)藥、23種鄰苯二甲酸酯、16種多環(huán)芳烴化合物、以及3種抗氧化劑。通過GPC處理食用油樣品，儀器檢測 使用氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜。
磐合科儀蔣家奎：在線樣品前處理與聯(lián)用分析技術(shù)的產(chǎn)品及應(yīng)用
上海磐合科學(xué)儀器股份有限公司的技術(shù)總監(jiān)蔣家奎先生做題為《在線樣品前處理與聯(lián)用分析技術(shù)的產(chǎn)品及應(yīng)用》的報告。他主要介紹了大氣中揮發(fā)性有機物 （VOCs）在線監(jiān)測系統(tǒng)及應(yīng)用；以及在線SPE-LC/MS分析聯(lián)用平臺及應(yīng)用。磐合科儀的大氣中揮發(fā)性有機物（VOCs）在線監(jiān)測系統(tǒng)組成包括：在線 采樣系統(tǒng)（雙冷阱設(shè)計和電子控溫），色譜分離系統(tǒng)（可配普通GC和快速GC），和檢測系統(tǒng)（如FPD、四極桿質(zhì)譜、TOF質(zhì)譜）。該系統(tǒng)應(yīng)用特點為：可安 裝在移動的監(jiān)測車、路邊站和常規(guī)的實驗室中使用；在線監(jiān)測大氣中臭氧前體物，大氣中非甲烷碳氫化合物NMHCs、鹵代烴、含氧有機物、含氮有機物；環(huán)境空 氣VOCs的晝夜變化和來源分析；分析大氣中含氟化合物，惡臭硫化物等。
磐合科儀的在線SPE-LC/MS分析聯(lián)用平臺組成包括：在線 SPE系統(tǒng)（包括固相萃取SPE，定量濃縮EVA，真菌毒素處理模塊）；LC/MS在線進樣模塊；分析檢測系統(tǒng)（可接市售主流品牌LC/MS）。該系統(tǒng)應(yīng) 用特點為：適用于食品安全﹑環(huán)境監(jiān)測、藥物研發(fā)﹑臨床診斷及藥理毒理和公安刑偵分析等領(lǐng)域；適合農(nóng)殘，獸殘，抗生素，毒品，興奮劑、食品非法添加物和真菌 毒素等分析。
浙江大學(xué)周建光：現(xiàn)場水體全組分富集溯源技術(shù)
浙江大學(xué)分析儀器研究中心的周建光教授做題為《現(xiàn)場水體全組分富集溯源技術(shù)》的報告。面對中國水源嚴重污染的現(xiàn)狀，現(xiàn)場快速溯源技術(shù)和方法仍是難題。周 教授課題組提出一種新穎的研究思路。世界現(xiàn)存化合物7500萬種且每年以百萬種的速度增長，其中90％以上是有機化物物，而元素種類只有110多種（見元 素周期表），課題組提出的思路為：基于新型材料建立元素比法溯源新技術(shù)（目前國內(nèi)尚未有元素比溯源方面的相關(guān)研究），預(yù)期優(yōu)點為：數(shù)量穩(wěn)定、快速方便、極 易推廣。
研究常見重金屬吸附材料和有機物固相吸附材料，課題組提出要選擇一種成本低的材料。中國石墨產(chǎn)量很高（比如山東即墨），價格便 宜。石墨酸化后可做膨化石墨，再往下做氧化石墨烯，還原可做石墨烯。膨化石墨吸附力是廣譜的，特別對有機物吸附能力很強；把可吸附重金屬的石墨“塞進”膨 化石墨中，就可以具有特別高的吸附廣譜性。膨化石墨中關(guān)鍵的參數(shù)是孔隙率要控制，可用低場核磁、拉曼、SEM進行結(jié)構(gòu)表征。最后可將吸附材料做成富集萃取 柱，實現(xiàn)現(xiàn)場快速高倍富集。另外該材料還可做單體傳感器。
周教授還介紹了MPT（微波等離子體炬）技術(shù)結(jié)合質(zhì)譜，可利用全元素離子化質(zhì) 譜分析技術(shù)，實現(xiàn)對有機物和無機物的廣譜分析。用氦氣做工作氣體，就可以電離周期表中所有元素。通過分段或集中式的控制，可以做有機物分析或無機物分析 （更高溫度），類比來說，可以同時實現(xiàn)DART和ICP的功能；后面連接四極桿質(zhì)譜。目前的研究數(shù)據(jù)表示，溯源結(jié)果是正向的。
清華大學(xué)邢志：低溫等離子體蒸汽發(fā)生分析方法研究
清華大學(xué)分析中心的邢志做題為《低溫等離子體蒸汽發(fā)生分析方法研究》的報告。首先他介紹了研究背景，化學(xué)蒸汽發(fā)生-原子熒光光譜（CVG-AFS）中可 分為有THB（硼氫化物）的方法和無THB的方法。傳統(tǒng)原子熒光使用硼氫化鉀/ 鈉法產(chǎn)生蒸汽發(fā)生；近年來還有紫外燈照射、甲酸乙酸等產(chǎn)生活性氫等方法產(chǎn)生蒸汽發(fā)生。無THB氫化物發(fā)生元素檢測方法，拓展了可檢測元素的范圍，但是仍需 要有機試劑參與反應(yīng)，測試過程的干擾和實際污染不可避免。那么，無試劑直接氫化物發(fā)生的活性氫是否可以來源于氫氣？那么可以實現(xiàn)更長期的連續(xù)在線采樣測 定。
等離子體分為高溫和低溫等離子體，那么是否可以形成氫等離子體？把氫氣通過一個高壓低頻、成本低廉的放電通道。產(chǎn)生低溫等離子體的 裝置-介質(zhì)阻擋放電（DBD），在兩個電極之間插入一個介質(zhì)，放電時就呈現(xiàn)絲網(wǎng)式的均勻的放電。課題組把氫氣和氬氣混合，用雙阻擋層的介質(zhì)阻擋放電通道， 形成非常強的混有氫的等離子體氣（氬氣為載氣）。樣品用雙層帶鞘流的噴霧毛細管，在出口形成均勻的µｍ級的霧滴，讓霧滴穿過氫等離子通道時，就可產(chǎn)生大量 的信號，后面用原子熒光檢測。對比各種條件的實驗證明，只有在放電通道打開且通氫氣時，才會產(chǎn)生信號。用水電解產(chǎn)生氫氣，不用硼氫化物，這種方法就可以產(chǎn) 生原子熒光的信號；還可以同時測定幾個元素。這樣就可以長時間在線分析。比如可設(shè)計成“只加水的原子熒光”。
課題組還用產(chǎn)生氫等離子體 的方法，探索了固體表面樣品的分析，并搭建了DBD固體樣品剝蝕及表面分析裝置，比如分析硒蛋白。以前分析用凝膠電泳法分離后，再挖下斑點進行消解 ICP-MS。但干擾大，需加碰撞反應(yīng)池，靈敏度比不加碰撞反應(yīng)池就直接降低了4-5倍。而原子熒光不存在Se的干擾，所以課題組也探索了直接分析凝膠上 Se斑點的方法。
邢老師總結(jié)說，課題組提出了一種新型蒸汽發(fā)生裝置與AFS連用新方法：基于介質(zhì)阻擋放電作為蒸汽發(fā)生手段，利用原子光 譜儀器作為檢測單元，進行液體及固體樣品分析。與現(xiàn)有液體樣品分析手段相比，具有設(shè)備簡單，無試劑的優(yōu)點。此方法為現(xiàn)有原子熒光光譜儀小型化提供了新的途 徑。
德國聯(lián)合分析系統(tǒng)解強：EPICS：簡捷農(nóng)藥分離和濃縮系統(tǒng)
德國聯(lián)合分析系統(tǒng)有限公司（JAS）的解強工程師做題為《EPICS：簡捷農(nóng)藥分離和濃縮系統(tǒng)》的報告。EPICS是一種全自動農(nóng)藥殘留分析系統(tǒng)，將樣 品初級提取物自動凈化濃縮，然后進行LC-MS/MS測定，目前可檢測農(nóng)藥類別超過300種。該系統(tǒng)針對不同的食品樣品基質(zhì)，進行自動分離和定量分析。最 低檢測限可低至1-10ppb。
EPICS的儀器配置為：HILIC親水色譜柱用于從基質(zhì)中分離農(nóng)藥；在親水色譜柱和反相色譜柱中間連接有一個吸附阱；農(nóng)藥將被“聚焦”和吸附；農(nóng)藥將由標準的反相色譜柱進行色譜分離。
EPICS的優(yōu)點為：高樣品通量，提高了生產(chǎn)力；無樣品制備過程，只需乙腈萃取；用二維色譜凈化樣品；數(shù)據(jù)質(zhì)量佳，因為EPICS提供了最佳的基質(zhì)分離；從一個粗萃取物可以直接分析所有的農(nóng)藥；盡管樣品基質(zhì)復(fù)雜，但依然有好的回收率。
博納艾杰爾陳小華：LC-MS/MS檢測中的生物樣品前處理
博納艾杰爾科技的陳小華經(jīng)理做了題為《LC-MS/MS檢測中的生物樣品前處理》的報告。陳經(jīng)理介紹說，公司30%的產(chǎn)品銷往國外，其中一個大客戶是 Quest，第三方檢測占了美國臨床檢測80%的市場，Quest是其中非常重要的公司。生物分析領(lǐng)域（BA，Bioanalysis）包括：臨床診斷 (Clinical Diagnosis)，體外診斷（In Vitro Diagnosis），藥物動力學(xué) (DMPK)，基因組學(xué) (Genomics)，蛋白組學(xué) (Poteomics)，代謝組學(xué) (Metabolomics)。博納艾杰爾主要涉及小分子領(lǐng)域。LC-MS/MS為生命科學(xué)帶來了飛躍式的發(fā)展，靈敏度高、準確度高、重現(xiàn)性好、定量分析 線性范圍廣、自動化高通量，適用于小分子藥物、生物標志物定量分析。
生物分析特點為：（1）生物樣品數(shù)量大，需要高通量的樣品處理和檢 測手段。（2）樣品量小，比如幾十微升-幾百微升，新生兒篩查只用3 mm 直徑的干血斑；雄激素水平檢測約用50 μL血清/血漿；葉酸檢測用< 300 μL血清。（3）基質(zhì)效應(yīng)多，比如：生物樣品中的磷脂、蛋白質(zhì)、鹽等有離子增強、離子擬制效應(yīng)，會直接影響對目標化合物的定量分析，故在進行LC- MS/MS分析前必須除去。
艾杰爾可提供：（1）高通量蛋白沉淀法，使用96孔蛋白沉淀板：無需離心，正/負壓收集洗脫液。（2）高通 量MAS法（改良QuEChERS法），MAS (Multi-function Impurity Adsorption SPE)，MAS 即“多重機制雜質(zhì)吸附萃取凈化法”，該方法主要利用多官能化的復(fù)合吸附材料，以離子交換、反相、氫鍵等機理去除生物樣品中的主要內(nèi)源性干擾物質(zhì)，同時將目 標藥物留在樣品溶液中，從而達到凈化和富集的目的。（3）高通量SLE法，Supported Liquid Extraction 固體支持液液萃取(Soild Supported Liquid Extraction)。（4）高通量SPE法；（5）高通量microSPE法。陳經(jīng)理并舉例了上述各種方法的各種應(yīng)用。
武漢大學(xué)馮鈺锜：基于天然材料樣品前處理方法
武漢大學(xué)的馮鈺锜教授做題為《基于天然材料樣品前處理方法》的報告。馮教授所在分離分析新技術(shù)與生物分析課題組，挑戰(zhàn)各種復(fù)雜的樣品。
馮教授首先介紹腐殖酸（HAS），HAS作為一種天然的寡聚物，已被證明含有烷基和芳環(huán)的骨架并附有羧酸基、酚羥基等官能團；HAS結(jié)構(gòu)上的特點與傳統(tǒng) 的MALDI基質(zhì)相似，并對小分子不產(chǎn)生干擾，適用于測定小分子。腐殖酸作為優(yōu)良的吸附劑已被用于多種有害物質(zhì)（如：多環(huán)芳烴，重金屬離子，氯酚，殺蟲劑 等）的分離和富集；固體腐殖酸無需提取，價廉易得；可以作為潛在的MALDI基質(zhì)。直接將羅丹明B點到腐殖酸上進入分子量檢測，可以獲得高信噪比，背景干 擾少。實例表明靈敏度高、抗干擾能力強。
其次介紹了巰基棉，是否可以巰基的反應(yīng)活性和巰基的配位功能讓巰基棉研究“老樹開新花”。課題 組制備了巰基棉-苯硼酸（SCF-PBA）和巰基棉-乙烯基膦酸-鋯離子（SCF-pVPA-Zr4+），可以有效富集磷酸化肽和糖基化肽。課題組還制備 出巰基棉-鎳（SCF -Ni2+ ）并表征，可以用于標準組氨酸蛋白的選擇性富集，在實際樣品中也證實，SCF-Ni2+用于大腸桿菌裂解液中組氨酸蛋白的選擇性分離，證明該材料可以從復(fù) 雜體系中成功純化組氨酸蛋白。羧基棉-鈦（CCC-Ti4+）的制備及其在磷酸化多肽富集中的應(yīng)用中，用CCC-Ti4+富集鼠腦組織中的磷酸化肽，在1 mg鼠腦蛋白中鑒定出了3950個磷酸化肽和4304個磷酸化位點。
最后介紹了花粉?；ǚ弁獗谥饕煞譃殒叻鬯兀攸c為：機械強度 高，耐高溫（275℃），抗強酸強堿，難生物分解，富含功能團，粒徑30-40 um，環(huán)境友好。將其填入SPE，用LC-MS/MS法測定16種植物生長調(diào)節(jié)劑（外源性激素），檢出限和回收率都很好。做成正相模式后，也可成功測定植 物油中白藜蘆醇等。
西安近代化學(xué)研究所張皋：火炸藥分析用樣品前處理技術(shù)研究
西安近代化學(xué)研究所的張皋主任做題為《火炸藥分析用樣品前處理技術(shù)研究》的報告。在火炸藥樣品前處理技術(shù)研究中，由于樣品的特殊性，較少有人研究，技術(shù) 落后，成為整個檢測過程的瓶頸。項目組的研究目標為：（1）保證新方法檢測準確性，使新方法可以代替舊方法（如：樣品的浸潤、分散）。（2）縮短整個檢測 時間（如：如樣品驅(qū)水、提?。堉魅谓酉聛砼e例介紹了一些前處理研究。
首先是浸潤與分散技術(shù)。比如：硝化棉含氮量測定法，以前的三種 方法已廢止（五管氮量法：容易引起汞中毒；狄瓦爾德合金法操作繁瑣，難以掌握；干涉儀法設(shè)備已停產(chǎn)）。課題組發(fā)展了偏光顯微鏡法，但同時需發(fā)展浸潤與分散 的前處理技術(shù)，張主任隨后介紹了項目組發(fā)展的方法。另一個例子是：超細粒徑的單質(zhì)炸藥（如奧克托今）的應(yīng)用日益廣泛，而經(jīng)典的水篩法安全隱患、勞動強度較 大，因此需要研究新檢測方法。項目組研究了激光衍射法，同樣也要發(fā)展浸潤與分散的前處理技術(shù)。
其次是樣品驅(qū)水技術(shù)，硝化甘油（NG）不 能直接運輸，運輸前需用硝化棉吸收NG，），制成吸收藥。為運輸安全，吸收藥還含有20%~40%的水。吸收藥中水分含量非常不均勻，要驅(qū)水后進行組分檢 測。由于NG受熱后易揮發(fā)分解，所以吸收藥烘水時溫度不能高于55℃（NG是低揮發(fā)性液體物質(zhì)，不能用抽真空法烘水），溫度低水分揮發(fā)慢，需要4小時左 右。項目組因此研究新方法，縮短驅(qū)水時間。項目中采用先壓延水分至1-3%后，再烘干的方式，把驅(qū)水時間從4小時縮短到1小時；而且用用卡爾費休法分別檢 測兩種方法驅(qū)水后的藥料中的殘余水分的結(jié)果表明，新方法法比原方法水分驅(qū)除更干凈，數(shù)據(jù)平行性更好
第三是組分提取技術(shù)。項目組對于有機 物和無機物，分別開發(fā)了一系列組分提取技術(shù)，再進行色譜法分析和定量。由于火炸藥不斷發(fā)展和改性，用傳統(tǒng)索氏提取方法效率變差，甚至達30小時，所以需研 究新提取方法，減少提取時間?？紤]到火炸藥不能高溫，溶脹等特殊性，改進方法時需嘗試更好的條件，將超聲波萃取、微波萃取、高溫高壓法萃取等民用法用于火 炸藥樣品的提取。結(jié)果表明，高溫高壓法適用于大多數(shù)火炸藥的提取。
安捷倫、島津、迪馬科技、德國聯(lián)合分析系統(tǒng)有限公司、青島正貞為會議提供了贊助，并在展臺上展示了產(chǎn)品。
DIKMA科技
青島正貞分析儀器有限公司
德國聯(lián)合分析系統(tǒng)有限公司
